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血清or無血清培養(yǎng)基的主要優(yōu)缺點

更新時間:2019-03-15  |  點擊率:1806

細(xì)胞培養(yǎng)基是細(xì)胞培養(yǎng)好壞的重要決定因素。近二十年來,無血清培養(yǎng)基越來越受到重視。它不含動物血清或其他生物提取液,仍可使細(xì)胞在體外較長時間生長、增殖或維持。它繼天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基之后發(fā)展而來,尤其應(yīng)用于哺乳動物細(xì)胞的大規(guī)模工業(yè)培養(yǎng)。同時,它也是研究細(xì)胞生長、增殖、分化及基因表達(dá)調(diào)控的有力工具。

 

常規(guī)培養(yǎng)基在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中添加了一定量的血清或組織提取物,它存在以下優(yōu)缺點:

優(yōu)點:

(1)血清作為天然培養(yǎng)基,含有豐富全面的細(xì)胞生長必需的營養(yǎng),具有極為重要的功能。

(2)提供維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素、生長因子以及一些低分子營養(yǎng)物。

(3)提供的結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,調(diào)節(jié)其活性。

(4)提供的結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。

(5)是細(xì)胞貼壁、鋪展所需的因子來源。

缺點:

(1)血清有時含有細(xì)胞生長抑制因子和毒性因子,存在潛在毒性。

(2)血清獲取成本高,價格較貴。

(3)血清由于成分不太明確,,給細(xì)胞培養(yǎng)的標(biāo)準(zhǔn)化帶來困難,同時也給細(xì)胞表達(dá)的目的產(chǎn)物純化帶來困難。

 

由于常規(guī)培養(yǎng)基存在的上述問題,無血清細(xì)胞培養(yǎng)基的開發(fā)和應(yīng)用漸成趨勢。無血清培養(yǎng)可在很大程度上可以避免血清所帶來的不利,但它同時也有一些不足。其優(yōu)缺點具體如下:

 

優(yōu)點:

(1) 其組成明確,可避免血清不同批次帶來的質(zhì)量變動,提高可重復(fù)性。

(2)避免血清對細(xì)胞的毒性作用和血清源性污染風(fēng)險。

(3)避免血清不明組分對實驗研究的影響。

(4)有利于體外培養(yǎng)細(xì)胞的分化。

(5)可提高細(xì)胞產(chǎn)物的表達(dá)水平并易于純化。

 

缺點:

(1)細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基中易受某些機械和化學(xué)因素的影響,培養(yǎng)基的保存和應(yīng)用不如傳統(tǒng)的合成培養(yǎng)基方便。

(2)成本較高。

(3)針對性很強,一種無血清培養(yǎng)基僅適合某一類細(xì)胞的培養(yǎng)。

(4)無血清培養(yǎng)基由于營養(yǎng)不如血清全面,可能存在潛在的營養(yǎng)不足。

 

締一生物為您介紹一款可用于Vero細(xì)胞無血清培養(yǎng)[1]的SFRE199培養(yǎng)基。它可作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,再添加其他成分后可用于Vero細(xì)胞的無血清培養(yǎng)。它對傳統(tǒng)培養(yǎng)基M199進(jìn)行了改良,開始是用于狒狒原代腎細(xì)胞的培養(yǎng),由生物公司HiMedia公司生產(chǎn)。

 

SFRE-199系列將M199配方中的部分成分進(jìn)行了調(diào)整:精氨酸增至150mg/L,半胱氨酸增至4mg/L,胱氨酸增至40mg/L,谷氨酰胺增至300mg/L,谷氨酸增至75mg/L,甘氨酸增至100mg/l,組氨酸增至40mg/L,酪氨酸增至80mg/L,以獲得較好的細(xì)胞生長而未表現(xiàn)出毒性。

 

SFRE199-1和SFRE199-2二者均含有L-谷氨酰胺、半乳糖和葡萄糖。SFRE M199-2(貨號AT090)含有Earle's鹽,而SFRE M199-1含有Hank鹽。兩種鹽的主要差別在于碳酸氫鈉的水平, 碳酸氫鈉在Eagles (2.2g/L)比在Hanks (0.35g/L) 中高。選用哪種取決于培養(yǎng)環(huán)境中的CO2濃度。

 

 

參考文獻(xiàn)

[1] Jack Litwin.The growth of Vero cells in suspension as cell-aggregates in serum-free media. State Bacteriology Laboratory, 105 21 Stockholm, Sweden.

 

締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商,在細(xì)胞培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)和檢測領(lǐng)域,一如既往地為您帶來的服務(wù)。

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