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支原體對細胞的不良影響,你應(yīng)該早知道

更新時間:2020-11-19  |  點擊率:929

近日《動物醫(yī)學(xué)進展》上有一篇文章《支原體對細胞培養(yǎng)污染的研究概況》(動物醫(yī)學(xué)進展,2013,34112-117)談到支原體污染細胞的嚴(yán)重性,里面提到:

  支原體早發(fā)現(xiàn)于1898年,1956Robinson等*從細胞培養(yǎng)物中分離出支原體,之后國內(nèi)外關(guān)于支原體污染細胞的報道屢見不鮮。它廣泛存在于自然界中,有100余種,污染細胞chang見的支原體包括發(fā)酵支原體( M.fementans)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)、口腔支原體(M.orale)、精氨酸支原體(M.arginina)、梨支原體(M.pirum)、唾液支原體(M.salivarium)和人型支原體(M.hominis)。

 

支原體通常附著在細胞的表面,并影響其宿主細胞的生理、遺傳等多方面的正常功能,用這些污染后貌似正常的細胞做實驗或生產(chǎn),將會嚴(yán)重影響結(jié)果。

A圖為正常的牛源細胞系MDBK。B圖為受到支原體污染的MDBK細胞。


  1、對細胞生長繁殖和形態(tài)的影響

  細胞培養(yǎng)物被支原體污染后生長減慢,且產(chǎn)生細胞病變,表現(xiàn)為細胞體積增大,碎片增多,在細胞質(zhì)中產(chǎn)生一些顆粒;細胞內(nèi)病毒繁殖受阻,使細胞形成空斑。光鏡下形成不正常密度生長的單層,貼壁細胞形成流沙樣脫落、裂解。某些支原體可在侵入細胞8小時使線粒體膨脹,繼而被破壞,細胞核萎縮呈空泡化,細胞微管解聚,培養(yǎng)瓶中細胞與細胞間隙出現(xiàn)膜狀沉積,細胞無法傳代,甚至整個細胞群體溶解。

  2、對細胞代謝和功能的影響

  有些被污染后的細胞,雖形態(tài)上變化不明顯,但培養(yǎng)液pH變化較大,更換培養(yǎng)液后幾小時就變酸,培養(yǎng)基中的必需氨基酸被消耗掉,改變細胞代謝。

  支原體吸附在細胞表面,破壞細胞膜的完整性,影響細胞信號傳遞;消耗細胞的核苷庫,引起細胞染色體異常;發(fā)酵型支原體能迅速降解簡單糖類,代謝產(chǎn)生的酸能改變細胞的功能;利用精氨酸的支原體則發(fā)生精氨酸效應(yīng),從而影響蛋白質(zhì)和核酸的合成、導(dǎo)致細胞的分裂和生長受阻;

 

支原體還引起細胞酶譜改變;由于支原體對細胞膜的吸附,干擾膜受體的功能,改變信號傳遞,破壞膜的完整性。在單克隆抗體制備中,骨髓瘤或雜交瘤細胞因支原體的污染而導(dǎo)致融合失敗或抗體分泌能力下降以至喪失。

  3、引起染色體異常

  改變?nèi)旧w組型,通??蓪?dǎo)致細胞染色體斷裂、數(shù)目減少,出現(xiàn)雙著絲點染色體、環(huán)狀染色體等。

  4、對免疫細胞產(chǎn)量的影響

  支原體能影響巨噬細胞的活性,抑制干擾素的合成和降低其活性,加大了繼發(fā)感染其他細菌和病毒的幾率,同時,通過植物血凝素干擾淋巴細胞的刺激、分化。

  因此,應(yīng)定期對你養(yǎng)的細胞進行支原體的監(jiān)測。支原體污染早期癥狀較清,肉眼看不出來。別讓支原體毀了你的實驗,浪費了你的時間。要想早期預(yù)防支原體,請選用一些支原體祛除劑(如ZellShield )。要想監(jiān)測是否有支原體,可選用一些支原體PCR檢測試劑盒(如 “VenorGeM支原體檢測試劑盒(一步法)),或可咨詢了解具體的預(yù)防方案。

 

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