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應對破壞細胞的支原體~qPCR支原體檢測試劑來幫你

更新時間:2021-02-08  |  點擊率:755

織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。

德國MB公司qPCR支原體檢測試,該試劑盒采用熒光定量PCR技術,是已建立的檢測方法,能一次檢測歐洲藥典(EP2.6.7)和日本藥典(JP G3)提到的所有支原體物種,并且能與大多數(shù)儀器配合使用。

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該試劑盒針對支原體基因組中的高度保守區(qū),具有快速、耐用和靈敏的特點。

該試劑盒的設計滿足歐洲藥典和日本藥典對于不同類型樣本(如軟骨細胞、血清、細胞培養(yǎng)上清)在DNA抽提后的檢測標準??芍苯訖z測細胞上清(研究領域),或者先對細胞培養(yǎng)物富集,或先抽提DNA。該試劑盒*符合EP2.6.7和JP G3的要求。

檢測原理:

該試劑盒擴增柔膜體對應的16S rRNA上的特異序列, 而真核細胞和其他細菌DNA不會被擴增。

試劑盒說明書同時包括細胞培養(yǎng)上清篩查和遵循歐洲藥典和日本藥典檢查的流程,包括對DNA抽提和對樣本體積的規(guī)定。整個檢測小于3小時。并且與ELISA、熒光染色和培養(yǎng)法不同的是,無須活支原體。和一些生化和細胞學方法相比,PCR具有更高的靈敏度和準確性。

試劑盒包含所有必要的PCR組分,

內(nèi)控DNA可用于鑒定PCR抑制或DNA抽提問題帶來的假陰性。內(nèi)控DNA可直接加到PCR預混液里,或加到DNA抽提之前的樣本中。它可用于驗證DNA抽提和qPCR擴增過程。它可從Minerva廠家購買(貨號11-9905)。內(nèi)控對照的擴增結果在560nm檢測(HEX通道),而支原體的擴增在520nm檢測(FAM通道)。

試劑盒包括dUTP,它替代dTTP,方便用尿嘧啶DNA糖基酶(UNG)監(jiān)視假陽性。該試劑盒不包含UNG。

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