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細(xì)胞培養(yǎng)中的污染監(jiān)控與檢測——真菌

更新時間:2022-03-04  |  點(diǎn)擊率:711

上一篇文章中,我們說到如果在養(yǎng)細(xì)胞的過程中,如何判斷細(xì)胞是否被細(xì)菌感染以及如何祛除細(xì)菌污染。

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細(xì)胞培養(yǎng)中的污染監(jiān)控與檢測——細(xì)菌

今天我們來討論一下,細(xì)胞培養(yǎng)過程中的真菌感染。


二、真菌污染

真菌概述

真菌是一類具真核和細(xì)胞壁的異養(yǎng)生物。真菌可以通過孢子延續(xù)種群,典型的營養(yǎng)體為絲狀分支結(jié)構(gòu)??晌廴炯?xì)胞培養(yǎng)基的真菌種類繁多,最常見的有曲霉菌,白色念珠菌,酵母菌,黑霉菌,孢子菌等。


真菌污染癥狀

與其他污染相比,真菌污染更容易被觀察到。具體表現(xiàn)為:

  • 在培養(yǎng)基中會形成淡黃色或白色的漂浮物,肉眼可見,較易被發(fā)現(xiàn)

  • 短期內(nèi)培養(yǎng)液多不變混濁

  • 顯微鏡下可以看見細(xì)胞之間或是培養(yǎng)基中,有縱橫交錯穿行的絲狀,樹枝狀或管狀菌絲

  • 多數(shù)菌絲在高倍鏡下可以觀察到鏈狀排列的菌株,而念珠菌及酵母菌菌株呈卵圓形,散落在細(xì)胞上及細(xì)胞周邊生長。


真菌污染的鑒定

將待檢測的細(xì)胞培養(yǎng)基,接種在真菌專用培養(yǎng)基上進(jìn)行鑒定,例如:馬丁培養(yǎng)基、沙氏培養(yǎng)基等。


真菌污染的處理方法

首先應(yīng)盡快把污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離開,不要打開培養(yǎng)皿,以免孢子飛出;


同時需要對實(shí)驗過程中所用的器材、試劑和操作空間做相應(yīng)處理:消毒液噴灑、紫外線消毒、高溫滅菌等;


高濃度的抗生素或是抗菌素(兩性霉素 B 、泰樂菌素等)對細(xì)胞會產(chǎn)生一定毒性,在使用前可以進(jìn)行劑量反應(yīng)實(shí)驗確定影響;


跟細(xì)菌污染的處理方法類似,通常情況下,霉菌污染的細(xì)胞,如果不是特別珍貴,建議直接丟棄。

如何預(yù)防支原體的污染

通常來說,被污染的細(xì)胞應(yīng)該丟棄,以避免成為污染源。但對于珍貴的細(xì)胞,以往別的品牌的支原體清除劑,其實(shí)只是抑制劑,它們抑制支原體的DNA合成和蛋白合成,但無法殺除。是市面上一款具有殺滅作用的清除劑。它提取自枯草桿菌,可與支原體膜特異性結(jié)合,破壞膜通透性,導(dǎo)致支原體膨脹破裂而死。


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