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細胞培養(yǎng)之——污染篩查

更新時間:2022-05-23  |  點擊率:740

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1、檢查培養(yǎng)液顏色與透明度的變化,顏色變黃,說明PH值下降;變紅或紫紅色,說明PH值上升,細胞生長停滯、死亡,一般生長穩(wěn)定的細胞2-3天換液一次,生長緩慢的細胞可3-4天換液一次。

2、觀察細胞生長狀態(tài),細胞長滿瓶底的80%,應(yīng)及時傳代。

3、觀察細胞形態(tài)變化,細胞透明度大、折光性強、輪廓清晰為佳。

4、注意微生物污染,常常出現(xiàn)培養(yǎng)液混濁,液體內(nèi)漂菌絲或細胞菌,不僅僅指微生物,包括所有混入培養(yǎng)環(huán)境中的細胞生存有害的成分和造成細胞不純的異物及細胞。

你培養(yǎng)的細胞被污染了,無非是下面幾個污染途徑:

1、空氣是微生物傳播的最主要途徑,操作時盡量避免說話、咳嗽、打噴嚏;

2、使用的培養(yǎng)器械及器皿清洗消毒不*;

3、培養(yǎng)兩種以上細胞時,操作不規(guī)范,可能導(dǎo)致細胞交叉污染;

4、血清有問題,可能血清在生產(chǎn)時就已經(jīng)被支原體或病毒污染;

5、原代培養(yǎng)的污染多數(shù)來源于組織樣本。

這里的工作區(qū)域包括實驗臺、超凈臺、培養(yǎng)箱(水槽除外)、液氮罐、移液器、門把手等細胞培養(yǎng)的環(huán)境。

使用德國MB公司生產(chǎn)的支原體祛除噴霧或濕巾(品名:Mycoplasma-off™),可在5-10分鐘清除支原體,高效快速,操作方便。

 

產(chǎn)品特點及原理:

1)快速有效

噴霧劑和濕巾中含有支原體專用殺除劑Mynox®,可在幾分鐘內(nèi)迅速殺除支原體。

與傳統(tǒng)的化學(xué)試劑熏蒸方法相比,更加安全;與傳統(tǒng)酒精處理、紫外線照射方法相比更有效!

2)廣譜抗菌

不僅能祛除支原體,而且能有效祛除葡萄球菌、腸球菌、大腸桿菌、奇異變形桿菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌、牛腹瀉病毒、腺病毒、多瘤病毒、諾如病毒、牛痘病毒、真菌孢子等。

3)無腐蝕性和致癌性

乙醇作為溶劑,無腐蝕性和致癌性成分。

4)操作簡便

即用型消毒液,可以快速簡單地保持工作區(qū)的清潔干凈。

 

使用方法及步驟:

 

噴霧劑:

注:對于細胞培養(yǎng)箱,內(nèi)部噴灑支原體祛除噴霧或用濕巾擦拭后,應(yīng)打開箱門通風(fēng)至少1小時。如培養(yǎng)箱帶熱滅活功能,可開啟該功能以替代風(fēng)干。

 

濕巾:

對于移液器,門把手,電子設(shè)備等,可使用支原體祛除濕巾。擦拭后,應(yīng)讓其被消毒物體的表面保持濕潤,再讓其自然風(fēng)干。

 

培養(yǎng)箱水槽和水浴鍋中預(yù)防支原體污染的方法

 

細胞培養(yǎng)環(huán)境中,培養(yǎng)箱水槽、水浴鍋經(jīng)常會有支原體以及各種細菌、霉菌滋生,稍有不慎或清洗不及時,水槽中的水源即會成為細胞污染的重要來源。

 

保持水槽的潔凈,對細胞培養(yǎng)的順利進行非常重要。

 

眾多實驗室日常都在使用德國MB公司生產(chǎn)的Water Shield支原體污染防護劑(水槽用)。Water Shield可持續(xù)作用四周,使水源避免受到支原體、細菌、酵母、霉菌和孢子的污染。

 

產(chǎn)品特點:

1)長效。Water Shield含表面活性劑、季銨鹽和絡(luò)合劑,不易揮發(fā),可持續(xù)作用4周。

2)安全。不含醛類或疊氮化物,對細胞無毒害。

3)廣譜。預(yù)防支原體、細菌、酵母菌、霉菌和孢子污染。

4)方便。Water Shield按1:200比例,直接加入水中,使用方便。

5)不產(chǎn)生水垢。

 

操作步驟:

1)Water Shield和蒸餾水可直接加入培養(yǎng)箱水槽或水浴鍋中。

2)Water Shield按1:200比例使用,例如:1000ml蒸餾水+5ml Water Shield,或10L蒸餾水+50ml Water Shield。

3)4周左右清洗水槽,換水,重新加入Water Shield。

 

注意事項:

避免吸入。眼睛接觸或長時間皮膚接觸可能會產(chǎn)生刺激性。因而,使用試劑時應(yīng)戴上護目鏡和一次性手套。一旦皮膚接觸,應(yīng)用大量水沖洗。

Water Shield對玻璃、陶瓷、塑料、橡膠、鋼制品、貴金屬和其他金屬安全性良好。

 

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