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高效復(fù)蘇細(xì)胞的秘訣

更新時(shí)間:2022-04-06  |  點(diǎn)擊率:683

細(xì)胞培養(yǎng)的開始,就是復(fù)蘇細(xì)胞。如何有條不紊地讓細(xì)胞從沉睡中蘇醒?今天就來給大家總結(jié)幾個(gè)實(shí)用小技巧,快點(diǎn)來get!

細(xì)胞復(fù)蘇流程:

1、將凍存的細(xì)胞從液氮罐中取出,立即放入37°C的水浴中進(jìn)行融化,輕柔晃動(dòng),加速融化,直到小瓶中只剩下一小塊冰,時(shí)長應(yīng)控制在1min中;

2、用70%乙醇擦拭瓶外后轉(zhuǎn)移無菌操作臺(tái)中,打開瓶蓋前,用酒精燈火焰對(duì)瓶口進(jìn)行消毒;

3、將預(yù)加熱的新鮮*培養(yǎng)基滴入小瓶中。緩慢用移液槍吸取瓶中液體至15ml離心管中,加入適量濃度和體積的*培養(yǎng)基,輕柔混合均勻;

4、200 × g左右細(xì)胞懸浮液離心5-10分鐘。實(shí)際的離心速度和持續(xù)時(shí)間因細(xì)胞類型而異。棄掉上清,加入新鮮*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并將其轉(zhuǎn)移到適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)容器和推薦的培養(yǎng)環(huán)境中。


細(xì)胞解凍流程圖


注意事項(xiàng):

1、液氮溫度低,小心低溫對(duì)人造成的傷害,在液相中儲(chǔ)存的冷凍瓶在解凍時(shí)存在爆炸的風(fēng)險(xiǎn),因此,取出凍存管的時(shí)候,要做好個(gè)人防護(hù)。

2、通常細(xì)胞集中儲(chǔ)藏在液氮中,取出時(shí)應(yīng)迅速,避免溫差對(duì)其他凍存細(xì)胞造成影響。

3、復(fù)蘇細(xì)胞的核心技術(shù),簡而言之就是快融,將在37°C水浴中快速解凍冷凍細(xì)胞(< 1分鐘。

4、解凍時(shí),凍存管先放入無菌一次性PE手套中,再放入水中融化,避免污染也方便操作。

5、用預(yù)熱過的培養(yǎng)基慢慢稀釋解凍的細(xì)胞。

6、解凍細(xì)胞后,在培養(yǎng)皿中培養(yǎng)時(shí),應(yīng)盡量維持高密度,以提高細(xì)胞存活率。

7、注意無菌操作,避免細(xì)胞發(fā)生污染。


細(xì)胞高效解凍的另一個(gè)成功秘訣,就是選擇一款優(yōu)質(zhì)血清!

Ausbian進(jìn)口特級(jí)胎牛血清,有以下優(yōu)點(diǎn),可以較大程度地幫助實(shí)驗(yàn)者提高細(xì)胞實(shí)驗(yàn)成功率:

1. 精選內(nèi)毒素更低批次(≤3EU/ml),原zhuang進(jìn)口。是細(xì)胞典藏等重大項(xiàng)目十幾年的穩(wěn)定供應(yīng)品牌。

實(shí)驗(yàn)室有些細(xì)胞,需要長期培養(yǎng)、長期凍存,或者經(jīng)常復(fù)蘇、經(jīng)常培養(yǎng)的,血清會(huì)經(jīng)?;蜷L時(shí)間作用于細(xì)胞。為保證細(xì)胞的健康,都應(yīng)該選用更低內(nèi)毒素的血清,以避免內(nèi)毒素長久對(duì)細(xì)胞的毒性影響。

2. 新批次在試用前,提供試用服務(wù),養(yǎng)細(xì)胞更放心。

3. 每個(gè)批次產(chǎn)量800-2000升,試用滿意的實(shí)驗(yàn)室批號(hào)優(yōu)先鎖定,保證大多數(shù)項(xiàng)目兩年不需換批次,細(xì)胞試驗(yàn)數(shù)據(jù)穩(wěn)定。

4. 每年按廠家生產(chǎn)順序,會(huì)有多批次平行供應(yīng),每個(gè)實(shí)驗(yàn)室專屬批號(hào)管理,保證供貨穩(wěn)定。

5. 為Ausbian血清用戶免費(fèi)提供申報(bào)支持,具有完整的檢測報(bào)告,為各類項(xiàng)目的申報(bào)提供支持(同時(shí)為血清VIP用戶在支原體檢測、方法學(xué)驗(yàn)證等方面,提供更多免費(fèi)延伸性技術(shù)幫助)。

6. 針對(duì)特殊科研項(xiàng)目,可提供3-5個(gè)平行批次,讓試驗(yàn)人有更多選擇空間。

7. 為Ausbian血清提供免費(fèi)代儲(chǔ)存服務(wù),為儲(chǔ)存空間不足的實(shí)驗(yàn)室提供可靠的血清倉儲(chǔ)保護(hù),按要求隨時(shí)發(fā)貨。

8. Ausbian血清從出廠,到實(shí)驗(yàn)室,全程低溫冷鏈保護(hù),確保血清無反復(fù)凍融。

9. 免費(fèi)真品保障,每個(gè)血清瓶身加貼Viansaga®易破損防偽標(biāo)簽,Ausbian品牌真品保護(hù),逢假必究,為實(shí)驗(yàn)室做好售后保障。

10. 免費(fèi)無憂售后,所有實(shí)驗(yàn)室簽收的Ausbian胎牛血清,從簽收日開始計(jì)算,一年之內(nèi),血清在妥善保管、未開封未融化、且不影響二次銷售的情況下,均可享受無條件退貨或換貨的售后保障。

11. 免費(fèi)專業(yè)幫助,匯集近二十年,千萬個(gè)血清用戶細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn),為各種細(xì)胞培養(yǎng)提供問題梳理分析,解決方案參考。

12. Ausbian品牌擁有全系列血清產(chǎn)品線:

特級(jí)胎牛血清、細(xì)胞治療專用胎牛血清(貨號(hào):WS500T(紅點(diǎn))),透析胎牛血清 (貨號(hào):VS500TZ )等多系列產(chǎn)品,服務(wù)更專業(yè)更精準(zhǔn)。


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