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細(xì)胞空泡化是怎么回事?該如何解決?

更新時(shí)間:2022-11-30  |  點(diǎn)擊率:1276

細(xì)胞空泡化也叫做細(xì)胞質(zhì)空泡化,是2019年公布的感染病學(xué)名詞。

具體表現(xiàn)為:變性細(xì)胞的胞質(zhì)、胞核內(nèi)出現(xiàn)大小不一的空泡(水泡),細(xì)胞呈蜂窩狀或網(wǎng)狀的現(xiàn)象。變性嚴(yán)重者,小水泡相互融合成大水泡,細(xì)胞核懸于中央,或被擠于一側(cè),細(xì)胞形體顯著腫大,胞質(zhì)空白,外形如氣球狀。

導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)空泡化的潛在因素

有一部分細(xì)胞質(zhì)空泡化可以是可逆的,這類型的空泡化一般存在于暴露在誘導(dǎo)劑的情況下。誘導(dǎo)劑引起細(xì)胞狀態(tài)的改變或者細(xì)胞周期停滯,表現(xiàn)為細(xì)胞質(zhì)空泡化。合理控制誘導(dǎo)劑使用范圍,在脫離誘導(dǎo)劑后,細(xì)胞通常會(huì)回復(fù)正常表型。

也有一部分細(xì)胞質(zhì)空泡化是不可逆的。這種情況下,一般會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡,許多外源化合物、細(xì)菌、病毒感染后均會(huì)出現(xiàn)不可逆的胞質(zhì)空泡化。

因此,導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)空泡化的常見因素,可以總結(jié)為以下幾點(diǎn)(如有更多觀點(diǎn),歡迎評(píng)論區(qū)補(bǔ)充):

1藥物誘導(dǎo)

一些特定的誘導(dǎo)劑處理,是細(xì)胞質(zhì)空泡化的原因,一般是需要觀察細(xì)胞變化而對(duì)細(xì)胞進(jìn)行的特殊處理。

2細(xì)胞老化

原代細(xì)胞培養(yǎng)的過程中有時(shí)會(huì)出現(xiàn)此類情況。一些細(xì)胞處于終末分化狀態(tài),不會(huì)再分裂,時(shí)間長(zhǎng)了就會(huì)空泡化而死亡。

對(duì)于永生化的細(xì)胞系進(jìn)行反復(fù)傳代,導(dǎo)致細(xì)胞嚴(yán)重老化,也會(huì)出現(xiàn)這一現(xiàn)象。

3滲透壓和pH值

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,如果培養(yǎng)基滲透壓或pH發(fā)生比較大的改變,或培養(yǎng)基的初始pH值與細(xì)胞正常所需pH值差別巨大,也容易使細(xì)胞生長(zhǎng)收到刺激,發(fā)生空泡化。

4胰酶消化

胰酶消化時(shí)間過長(zhǎng),或是在吹打細(xì)胞時(shí)太過大力而產(chǎn)生太多氣泡,都容易導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)受損,長(zhǎng)期如此,可能引起細(xì)胞質(zhì)空泡化。

5細(xì)胞代謝

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,由于血清質(zhì)量差或是濃度過低等情況下,可能導(dǎo)致細(xì)胞代謝出現(xiàn)問題,如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激從而引起細(xì)胞質(zhì)空泡化的現(xiàn)象。

6細(xì)胞自噬

當(dāng)細(xì)胞缺乏營(yíng)養(yǎng)處于饑餓狀態(tài)時(shí),也容易因細(xì)胞自噬而產(chǎn)生空泡,形成自噬小體,但是自噬小體僅能在電鏡下觀察到,光學(xué)顯微鏡下是觀察不到的。

7細(xì)胞污染

支原體污染:支原體污染的初期,細(xì)胞是沒有什么明顯癥狀的,而且也無法通過光學(xué)顯微鏡觀察到,只有在嚴(yán)重的時(shí)候會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)變差,出現(xiàn)細(xì)胞空泡化的現(xiàn)象,細(xì)胞膜上也會(huì)出現(xiàn)小黑點(diǎn)附著,以及培養(yǎng)基變色速度加快這類癥狀。

病毒污染:一些文獻(xiàn)上也有記錄,觀察到病毒污染也會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)空泡化的情況。

細(xì)胞質(zhì)空泡化怎么辦?

由于導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)空泡的原因眾多,因此要仔細(xì)分析,尋找解決方案。

1)如果是因?yàn)榧?xì)胞老化導(dǎo)致的,可以通過復(fù)蘇代數(shù)靠前的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)來解決細(xì)胞空泡問題。

2)調(diào)整培養(yǎng)基至合適的pH,再進(jìn)行培養(yǎng),來解決因pH差異大而導(dǎo)致的細(xì)胞空泡問題。

3)在傳代時(shí),選擇科學(xué)的消化方法:合適的胰酶濃度、適當(dāng)?shù)南袌?chǎng),在操作時(shí)避免吹打太過用力出現(xiàn)太多氣泡。

4)要保證細(xì)胞培養(yǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)充足,可以根據(jù)情況,適當(dāng)增加血清濃度以及谷氨酰胺。

5)選擇質(zhì)量?jī)?yōu)質(zhì)、渠道正規(guī)的胎牛血清,優(yōu)質(zhì)胎牛血清經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量檢測(cè),外源物質(zhì)盡可能做到更低,減少對(duì)細(xì)胞的刺激;渠道正規(guī)的胎牛血清,全程冷鏈運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融而帶來的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的損耗,細(xì)胞生長(zhǎng)更安心。

Ausbian進(jìn)口特級(jí)胎牛血清, 精選內(nèi)毒素更低的批次(≤3EU/ml),微生物檢測(cè)結(jié)果均為未檢出,全程冷鏈運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融。

6)在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)要嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作,操作時(shí)要規(guī)范,減少污染的可能性。對(duì)于實(shí)驗(yàn)環(huán)境與器械,可以用實(shí)驗(yàn)環(huán)境專用的污染清除試劑:Mycoplasma-off™、Water Shield™,有效預(yù)防實(shí)驗(yàn)環(huán)境中的支原體污染。


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